Tip:
Highlight text to annotate it
X
W drugim dniu naszego postępowania ICC dodamy nasze drugie przeciwciało, wykonaj
opcjonalne podwójne oznaczanie i jądrowa krok etykietowanie,
zamontować nasze nakrywkowe do slajdów i uzyskać obrazy naszych przeciwciał z
mikroskopu fluorescencyjnego.
Pierwszy
mamy aspirację off rozwiązania pierwotnego przeciwciała następuje poprzez mycie komórki
trzykrotnie PBST pięć minut każdy.
Następna przygotować floraform sprzężonego wtórne przeciwciało, które wiążą się
pierwszego przeciwciała.
Rozcieńczyć wtórnego bufor blokujący
w rozcieńczeniu zalecane określonym w arkuszu danych
i inkubowano w temperaturze pokojowej przez jedną godzinę.
Pokrycie płyt folią zabezpiecza wrażliwe barwników z poniżające.
Aspirację się wtórny roztwór przeciwciał następnie przemywanie komórek
trzykrotnie PBST
pięć minut każdy.
W opcjonalnym kroku oddzielne pary pierwotnej i wtórnej może być
wizualizację drugi epitop przy innej podłogi dla niego.
Ponadto, DNA, takie jak wiązania DAPI barwniki mogą być stosowane bez potrzeby
przeciwciała drugorzędowe.
Odwoływanie się do pełnego pisemnego protokołu Novus na instrukcje i dwukrotnie
potrójne etykieta.
Nakrywkowe są już gotowe do montażu na szkiełkach mikroskopowych.
Weź czysty slajd i zrezygnowanie kroplę antifade osadzania powoli
wybieranie dół tłok pipety.
Ostrożnie usunąć nakrywkowe ze studni,
pozwól, pranie na kapie
i umieścić komórki zakryte na slajdzie.
Jasne polski paznokci może być stosowane do uszczelniania i do nakrywkowe uniemożliwić
wysychaniem.
Szkiełka mogą być widoczne pod mikroskopem i przechowywano w temperaturze -20
lub 4 stopni Celsjusza w ciemnym polu slajdów lub książki slajdów.
Ograniczenie ilości czasu, każdy slajd jest narażona na światło mikroskopu będzie aide
w przedłużeniu sygnał fluorescencyjny
i uniemożliwić zdjęcie wybielania.